ABSTRACT
Para superar la escasez de tejido disponible para injerto en los tratamientos quirúrgicos convencionales de las lesiones de la mucosa bucal, se ha propuesto elaborar sustitutos de mucosa empleando las técnicas desarrolladas por la ingeniería tisular. En Colombia, este campo es incipiente y hasta ahora se conocen los primeros esfuerzos para elaborar injertos artificiales que sustituyan al tejido propio cuando éste es escaso. En investigaciones previas, nuestros grupo estandarizó un método de cultivo de fibroblastos primarios (aislados de piel humana) sobre un soporte de colágeno I. Los análisis histológicos y moleculares de los cultivos realizados mostraron la producción de matriz extracelular característica de la dermis. En el presente trabajo estandarizamos los métodos requeridos para elborar tejido conjuntivo oral, a partir de mucosa qureratinizada humana. La metodología establecida fue aplicada para desarrollar tejido conectivo oral de conejo, el cual se evaluó como injerto autólogo en heridas inducidas en los conejos fuentes de las células utilizadas en su preparación. El comportamiento de los tejidos artificiales in vitro e in vivo, en todas las etapas de su desarrollo, fue seguido histológica y molecularmente. Para los análisis histológicos se emplearon coloraciones convencionales con hematoxilina-eosina y azul de alciano. Para los estudios moleculares, se llevaron a cabo análisis de la expresión de genes de proteínas constitutivas de la matriz extracelular mediante transcripción reversa y reacción en cadena de polimerasa (RT-PCR). El conjunto de nuestros resultados indica que el tejido autólogo desarrollado in vitro funciona como cobertura biológica en heridas mucosas. Durante los procedimientos quirúrgicos se observó que los injertos artificiales se posicionan en el sitio del defecto con facilidad, favorecen la hemostasia y cubren adecuadamente la herida. A nivel histológico, a las 4 y 8 semanas, se observó presencia de epitelio plano crónico no queratinizado con una capa basal activa, proliferación fibroblástica y en algunos casos, la presencia de infiltrado inflamatorio crónico leve en el tejido conectivo subyacente
Subject(s)
Animals , Rabbits , Biopsy , Cell Culture Techniques , Histological Techniques , In Vitro Techniques , Tissue Engineering/methods , Rabbits , Polymerase Chain Reaction/methods , Transcription, Genetic , Transplantation, Autologous/methods , Wound Healing , ColombiaABSTRACT
Varias lesiones que tienen como resultado pérdida de mucosa oral (malformaciones, enfermedad periodontal, trauma y tumores entre otras) pueden afectar la integridad de la cavidad oral humana. La vida de quienes la sufren, se altera clínica-psicosocial y económicamente debido a la estética y funcionamiento defectuosos, mayor riesgo de infecciones, dolor y molestia severa. Reemplazar la mucosa oral puede llegar a ser difícil, debido a la cantidad limitada de tejido disponible para el autoinjerto y a la morbilidad en el sitio donante. Cuando la mucosa oral es escasa, se emplean como injertos piel antóloga o mucosa gástrica. Infortunadamente, estas aproximaciones no siempre dan buenos resultados debido a la aparición de secreciones, crecimiento de anexos de la piel y patrones diferentes de queratinización. Por lo anterior, se hace necesario buscar nuevas fuentes de tejido oral. En otros países se adelantan investigaciones para desarrollar, con células vivas unidas a un substituto de matriz, un tejido de mucosa oral funcional. De hecho, cultivos de epitelio gingival y láminas de mucosa artificiales han sido probados con algún éxito como injertos en ensayos preclínicos y clínicos. Este artículo presenta una revisión de los modelos de tejido mucoso oral desarrollados in Vitro y las valoraciones de esos productos efectuadas hasta el momento.